Исследование нуклеации кристаллов холестерина

20.07.2016
Клинические исследования показывают, что желчь пациентов с холестериновыми желчными конкрементами и лиц контрольных групп (пациентов без камней и даже здоровых лиц) часто перенасыщена холестерином и что степень перенасыщения желчи холестерином также не является надежным показателем, свидетельствующим о неизбежности формирования желчных конкрементов.

Поэтому наиболее точным показателем, указывающим на начало процессов кристаллизации, является время нуклеации, которое всегда меньше но сравнению с контрольными группами.

Как отмечено выше, время нуклеации — это время с момента инкубации желчи до появления первых пластинчатых кристаллов моногидрата холестерина в изотропной желчи, культивированной in vitro при 37 °С.

Этот показатель обеспечивает надежное различие желчи больных с холестериновыми желчными конкрементами и лиц контрольных групп.

Отличия в показателях времени нуклеации в различных клинических группах дали основание предполагать, что человеческая желчь содержит факторы, ингибирующие или ускоряющие формирование кристаллов холестерина.

В желчном пузыре человека, содержащем супернасыщенную холестерином желчь, желчные конкременты формируются и растут путем сращивания кристаллов холестерина. Первым шагом к образованию холестериновых желчных камней становится наличие микроскопических кристаллов моногидрата холестерина. Несмотря на схожие условия насыщения желчи холестерином, этот процесс происходит быстрее в желчи больных, уже имеющих холестериновые камни, чем у пациентов без желчных конкрементов.

Нуклеация холестерина традиционно считается самым начальным этаном кристаллизации, когда с помощью поляризационного микроскопа в исходно изотропной желчи обнаруживаются пластины кристаллов холестерина. Быстрая in vitro нуклеация кристаллов моногидрата холестерина «изотропной фазы» желчи, отличает литогенную желчь желчного пузыря пациентов с холестериновыми желчными конкрементами от перенасыщенной холестерином желчи.

Для понимания кинетики и объяснения причин переходов промежуточных фаз желчи в метастабильные были особенно тщательно изучены последние фазы, что позволило па модели искусственной желчи установить 5 путей кристаллизации, зависящих: 1) от соотношения желчных кислот и фосфолипидов; 2) общей концентрации липидов; 3) состава желчных кислот (гидрофильные/ гидрофобные); 4) температуры среды: 5) индекса насыщения желчи холестерином. В последующем эти пути кристаллизации были подтверждены в исследованиях желчи мышей и человека.

Исследования показали, что последовательность перехода фаз начинается с обезвоживания кристаллов холестерина, затем происходит их кристаллизация, а конечным этапом является формирование твердых кристаллов моногидрата холестерина. Эти этапы хорошо задокументированы с помощью поляризационной световой микроскопии (рис. 5.4),

Интересно, что появление аркоподобных кристаллов совпадает с обезвоживанием кристаллов холестерина. В связи с этим предполагают, что для формирования кристаллов моногидрата холестерина необходимо соединение везикул желчи. Учитывая тот факт, что нуклеация холестерина инициируется еще в везикулах, стабильность везикул определяет соответственно и стабильность желчи. Кроме того, известно, что нестабильные везикулы могут соединяться и превращаться а мультиламеллярные жидкокристаллические структуры (липосомы), в этих ситуациях кристаллизация холестерина может происходить и из раствора.
Исследование нуклеации кристаллов холестерина

Исследования, проведенные с помощью квазиэластической сканирующей спектроскопии, показывают, что нуклеация твердых кристаллов холестерина in vitro может начинаться непосредственно в перенасыщенных мицеллах, богатых конъюгированными деоксихолатами, без вмешательства везикул или наличия жидкокристаллической фазы. Подобное состояние может случиться из-за необычных соотношений равновесной фазы трехкомпонентной системы, состоящей из очень гидрофильных желчных кислот.

Следует отметить, что несмотря на значительные достижения в изучении фазовых состояний желчи, убедительно объясняющие процессы нуклеации in vitro, in vivo на процессы нуклеации оказывает влияние еще множество других дополнительных факторов, которые необходимо учитывать при исследовании кристаллизации в клинических условиях.

Задерживают нуклеацию:

• низкая концентрация общих липидов — менее чем 3 г/дл:

• уменьшение гидрофобности общего пула желчных кислот;

• низкое соотношение желчных кислот и лецитина;

• низкое соотношение холестерина и лецитина в везикулах;

• низкая концентрация ионов кальция.

Естественно, что противоположные состояния ускоряют процессы нуклеации.

Более быстрая кристаллизация холестерина в желчи пациентов с желчными конкрементами, с одной стороны, дала основание предполагать, что литогенная желчь содержит компоненты, ускоряющие нуклеацию, с другой - что нормальная желчь может содержать вещества, ингибирующие кристаллизацию. Это предположение подтверждали и клинические наблюдения: с помощью УЗИ показано, что билиарный сладж и даже желчные конкременты в ряде случаев могут исчезать спонтанно, без лечебного воздействия.

Впоследствии с помощью лабораторных методов исследования было установлено, что желчь содержит и катализаторы и ингибиторы кристаллизации и их дисбаланс в сторону преобладания первых может вызвать быструю кристаллизацию холестерина в желчи желчного пузыря.

Таким образом, в желчи была выявлена система, способная стабилизировать коллоидные свойства желчи и тем самым уравновешивать процессы, ускоряющие (пронуклеирующие факторы) и замедляющие (антинуклеирующие факторы) холелитиаз.

Пронуклеирующий фактор — фактор, который вызывает осаждение кристаллов холестерина в желчи и сокращает время нуклеации.

Антинуклеирующий фактор — фактор, который задерживает кристаллизацию холестерина в желчи, увеличивает время нуклеации.
Пронуклеирующие и антинуклеирующие факторы могут влиять на процесс нуклеации в одном месте или одновременно в разных точках, на этапе соединения ядра с молекулами холестерина, разрушения или слияния везикул и, наконец, при формировании жидких кристаллов моногидрата холестерина.

Пронуклеирующие факторы


Муцин был первым белком желчи, который вызывает кристаллизацию холестерина, поэтому его роль как пронуклеирующего фактора подробно изучена. Эпителиоциты слизистой оболочки желчного пузыря непрерывно секретируют муцин, который служит защитным слоем слизистой оболочки от механических повреждений, облегчает поступление желчи в желчный пузырь и эвакуацию желчи во время сокращения пузыря.

Гликопротеиды муцина — большие молекулы, состоящие из белкового ядра и многих боковых цепей углевода, нерастворимы в воде. Муцины желчного пузыря, гетерогенное семейство О-связанных гликопротеидов, разделяются на 2 класса: эпителиальные и гельобразующие.

Предполагается, что эпителиальные муцины, продуцируемые геном муцина 1 (Muc1), а также Muс3 и Muc4, не способны формировать агрегаты и являются составной частью мембранных гликопротеидов, располагающихся на апикальной поверхности эпителиоцитов. Гельобразующие муцины, Muc2, Muc5ac и Muc5b, секретируемые специализированными муцин-продуцирующими клетками желчного пузыря, обеспечивают протективное действие слизистой оболочке. так как обладают вязкоупругими свойствами.

Структурной особенностью муцинов является наличие у них гидрофильных доменов, способных связывать много молекул воды. Кроме того, гидрофильные домены в молекуле муцина позволяют связывать липиды, такие как холестерин, фосфолипиды, а также билирубин. К тому же муцины имеют электрический заряд и способны к связыванию других компонентов желчи, включая кальций.

Накопленные знания дали серьезное основание считать, что муцины желчного пузыря имеют важное значение в формировании холестериновых желчных камней уже па ранних стадиях и являются мощным пронуклеирующим фактором, ускоряющим кристаллизацию холестерина как в нативной, так и смоделированной желчи. Как известно, гликопротеиды муцина секретируются непрерывно желчным пузырем, но в особенно большом количестве у больных с холестериновым холецистолитиазом.

Муцины обнаружены в холестериновых желчных конкрементах, где они играют роль матрицы для образования и роста камней. Установлено, что муцины в желчных камнях распространяются начиная от центра ядра до периферии в виде лучей или концентрически.

Исследованиями S. Lee и соавт. еще более 20 лет назад показано, что муцины желчи — главный компонент сладжа — предшественника желчных конкрементов. В связи с этим в настоящее время муцину желчи можно отвести две главные роли в формировании желчных конкрементов: 1) как пронуклеирующее средство в насыщенной холестерином желчи; 2) как строительный каркас для депонирования кристаллов холестерина, формирования билиарного сладжа и последующего роста желчных камней.

На основании многочисленных исследований логично предположить, что, ингибируя секрецию и накопление муцина в желчном пузыре, можно предотвратить формирование холестериновых желчных конкрементов. Однако впоследствии было найдено много других белков, ускоряющих кристаллизацию холестерина, в том числе и гликопротеидов немуцинового происхождения, среди которых признанными пронуклеаторами считаются аминопептидаза N, фосфолипаза С, α1-кислый гликопротеид, иммуноглобулины желчи, гаптоглобин и др.

Аминопептидаза N. При изучении белковых фракций желчи выделен белок массой 130 кДа, содержащийся в каналикулярной мембране гепатоцитов, а так же в холангиоцитах всего билиарного дерева и обладающий ферментативной активностью, впоследствии обозначенный как аминопептидаза N.

Аминопептидаза N, относящаяся к классу гидролиз, в физиологических условиях катализирует отщепление от пептидов N-концевых аминокислотных остатков, она способна вызывать и кристаллизацию холестерина в желчном пузыре.

Фосфолипаза С. Относится к группе фосфолипаз — ферментов, гидролизирующих фосфолипиды. Фосфолипаза С гидролизует связь между глицериновым остатком и полярной группой.

Исследования, касающиеся роли фосфолипаз в билиарном литогенезе, достаточно подробно изучены еще в 90-е годы прошлого столетия. Однако первоначальные исследования, проведенные в 1989 г. А.К. Groen и соавт., не позволили определить значение фосфолипаз желчи (А2, С и D) в билиарном литогенезе. Авторы не отметили изменения времени нуклеации па образцах желчи больных с различными желчными камнями, или эффект был получен лишь при ее высокой концентрации. На этом основании было сделано заключение, что фосфолипазы, включая и фосфолипазу С, не играют важной роли в патогенезе желчнокаменной болезни.

Последующие экспериментальные исследования па модели искусственной желчи с добавлением фосфолипидов показали, что фосфолипаза С одновременно с расщеплением фосфолипидов уменьшает время нуклеации желчи, а при ее инактивации время нуклеации желчи удлиняется и прекращается гидролиз липидов. Аналогичный эффект наблюдался и при добавлении бактериальной фосфолипазы С. Более поздние исследования с использованием высокоинформативных методов, в том числе позволяющих проследить и слияние везикул в перенасыщенной холестерином желчи, показали, что продукты гидролиза фосфолипазы С даже в малой концентрации приводят к дестабилизации и слиянию везикул с последующим формированием кристаллов холестерина.

α1-кислый гликопротеид (орозомукоид) относится к фракции α1-глобулинов, обладает широким спектром функций, используется для индикации острофазового ответа. При острой воспалительной реакции уровень белка в сыворотке крови может повышаться в 2-4 раза. В диагностических титрах отмечается при острых воспалительных процессах и обострении хронических, включая заболевания печени.

Многочисленные исследования показывают, что содержание α1-кислого гликопротеида попытается в литогенной желчи, где он вызывает пронуклеирующий эффект. Это дало основание включить α1-кислый гликопротеид в группу пронуклеаторов желчи. При повышении концентрации в желчи α1-кислого гликопротеида время нуклеации сокращается до 5 дней. Имеются сообщения о том. что уровень этого белка в желчи чаще повышается при многочисленных холестериновых камнях. Интересны исследования J.F. Miquel и соавт., попытавшихся объяснить высокую распространенность ЖКБ среди жителей Чили возможным повышением α1-кисло го гликопротеида. В качестве контроля были выбраны больные желчнокаменной болезнью, проживающие в Нидерландах. Однако эти предположения не подтвердились. Уровень гликопротеида в обеих группах был повышен, но статистически не отличался.

Иммуноглобулины. В небольшом количестве они являются одним из естественных компонентов желчи, их концентрация увеличивается при инфицировании билиарного тракта. Исследования, проведенные в 90-е годы прошлого столетия, показали, что иммуноглобулины, так же как и другие белковые фракции желчи, вызывают пронуклеирующий эффект, который зависит от концентрации и класса иммуноглобулинов.

По степени активности вызывать кристаллизацию холестерина иммуноглобулины располагаются следующим образом; IgM ≥ IgG ≥ IgA. Перенасыщение желчи холестерином одновременно сопровождается повышением и концентрации IgG. В эксперименте на собаках установлено, что этот эффект обусловлен повышенной пролиферацией плазматических клеток слизистой оболочки желчного пузыря. Причем этот процесс начинается на ранних стадиях формирования желчных конкрементов, что в определенной степени подтверждает старое мнение: воспалительный процесс в стенке желчного пузыря предшествует формированию желчных камней. Учитывая различия в пронуклеирующем эффекте разных классов иммуноглобулинов можно предполагать, что увеличение в желчи концентрации IgA по сравнению с другими классами может не усиливать, а оказывать тормозящее влияние на процессы нуклеации.

Однако результаты, полученные in vitro, невозможно экстраполировать и оценивать их комплексное влияние на процессы нуклеации in vivo. Так, отдельными исследованиями показано, что при наличии, например, в желчи двух пронуклеирующих факторов (иммуноглобулинов и α1-кислого гликопротеида) осаждение одного из них не ослабляло процессов кристаллизации. Исследования, проведенные в клинике, указывают, что белковые фракции желчи, вызывающие пронуклеирующий эффект in vitro, в нативной желчи часто этот эффект либо не подтверждают, либо он существенно снижен. Возможно, это связано с тем, что в настоящее время более 60% белков желчи еще не идентифицированы и остаются «без вести пропавшими». Этот факт не позволяет исключить наличие и других, возможно, более важных промоторов нуклеации желчи у человека.

Исследованиями G. Yamashita и соавт. показано, что гантоглобин, содержащийся в физиологических концентрациях в желчи (15 мкг/мл), обладает в 2 раза большей пронуклеирующей активностью но сравнению с IgM (75 мкг/мл), используемым в качестве эталона сравнения (р < 0,05), Tpaнcферрии желчи (20 мкг/мл) обладает статистически достоверной активностью но сравнению с эталоном (р < 0,05), но значительно меньшей но сравнению с гатттоглобином. α1-антитрипсин желчи (50 мкг/мл) в отличие от гаптоглобина и трансферрина вообще не обладает пронуклеирующей активностью. Пo мнению авторов, па долю гаптоглобина приходится около 30% пронуклеирующей активности желчи, и на этом основании они предлагают рассматривать его в качестве главного кандидата в понимании процессов холестеринового холелитиаза.

Известно, что изоформы аполипопротеида E связаны с нарушением обмена холестерина. В частности, аполипопротеид Е4 (Aпo Е4) является фактором риска первичного формирования холестериновых желчных конкрементов, особенно многочисленных, и их рецидивов. В связи с этим предприняты попытки исследовать влияние Aпo Е4 на процессы кристаллизации холестерина в желчи. K.J. Van Erpecuin и соавт. у больных с многочисленными и одиночными камнями в желчном пузыре изучили степень насыщения желчи холестерином, а также концентрацию иммуноглобулинов A, G, α1-кислого гликопротеида, гаптоглобина, аминопептидазы N, муцина и Aпo Е4. Все промоторы кристаллизации не отличались между собой в зависимости от их концентрации, в том числе и в группах больных с многочисленными или одиночными камнями. Исключение составила лишь аминопептидаза N, активность которой у первых равнялась 2607 ± 592 MЕ/мл и 947 ± 185 ME/мл у вторых. Примечательно, что скорость нуклеации у больных с многочисленными и одиночными камнями существенно отличалась. Так, скорость кристаллизации при наличии многочисленных камней составила 3,5 ± 0,6 дня, а одиночных — 12,7 ± 2,4 дня (р = 0,0003). Таким образом, авторам не удалось подтвердить особую роль Апо Е4 в процессах нуклеации при многочисленных желчных камнях, как и объяснить причину разницы во времени нуклеации в зависимости от количества камней в желчном пузыре.

К пронуклеаторам желчи относят фракцию амфифильного кальцийсвязывающего белка, альбумино-липидные комплексы, фосфолипазы A2. Heпpoтеиновые компоненты желчи также ускоряют кристаллизацию холестерина. Кальций, связанный с мицеллами и везикулами желчи, может ускорять кристаллизацию холестерина, вызывая слияние богатых холестерином везикул. Осаждение солей кальция в желчи, перенасыщенной холестерином, может привести к быстрой кристаллизации холестерина, при этом эффект существенно увеличивается при наличии муцинов.

Независимо от вида пронуклеатора ведущая роль в формировании кристаллов холестерина принадлежит степени перенасыщения желчи холестерином, которая определяет как скорость кристаллизации, так и рост желчных камней.

Helicobacter spp. Роль инфекции при ЖКБ изучалась достаточно долго и нашла свое подтверждение в формировании пигментных (коричневых) желчных камней, локализующихся преимущественно в желчных протоках. Образование этих камней связывают с инфицированием желчных путей (кишечная палочка, клостридии, бактероиды и др.), так как под влиянием β-глюкуронидазы бактерий происходит деконъюгация диглюкуронида билирубина, в результате чего осаждается нерастворимый неконьюгированный билирубин.

Однако роль инфекции в формировании холестеринового холелитиаза оставалась не доказанной. Исключением являются исследования, проведенные и последние 10- 15 лет, свидетельствующие о том, что пилорические и энтерогепатические хеликобактеры могут принимать участие в образовании холестериновых желчных камней. Это основывалось на том, что участи больных ЖКБ желчь может содержать белок массой 130 кДа, связанный с активностью аминопептидазы, который способен вызывать кристаллизацию холестерина. Как известно, у более 90% штаммов Н. pylori имеется подобная пептидазная активность.

Учитывая высокую распространенность хеликобактериоза в человеческой популяции, можно предполагать участие Н. pylori в билиарном литогенезе. Как показывают исследования, у больных, инфицированных Н. pylori, в желчи содержатся специфические антитела к Hp (до 62% случаев), что может быть фактором увеличенного риска формирования желчных камней.

Дальнейшие исследования показали, что в билиарном тракте человека присутствуют различные виды Helicobacter, отличающиеся количеством микробов, а их общее число может превышать Н. pylori. Эти разновидности Helicobacter (Н. rappini, Н. bilis, Н. canis, Н. cholecystus, Н. pullorum и др.) колонизовали терминальный отдел топкой кишки и были способны к энтерогепатической транслокации. Как показали исследования, эти микробы in vitro были устойчивы к бактерицидному действию желчи, что позволяло им приспосабливаться к обитанию в билиарном тракте.

В связи с этим особый интерес представляют исследования К. Maurer и соавт. Авторы предполагают, что энтерогепатические хеликобактеры Н. bilis, II. hepaticus, Н. rodentium играют важную роль в формировании холестериновых желчных камней у мышей и, возможно, человека и предлагают назвать этот вид хеликобактеров «холелитогенным».

Однако остается неясным, на какие звенья холестеринового литогенеза влияет хеликобактерная инфекция. Известно, что желчь, перенасыщенная холестерином и содержащая кристаллы холестерина, стимулирует продукцию муцина слизистой оболочкой желчного пузыря. Муцин, как известно, относят к пронуклеирующим факторам, кроме того, он является своеобразным «цементирующим» раствором, который, скрепляя кристаллы холестерина вместе, формирует желчные камни.

В последние годы доказано, что в билиарном литогенезе продукция слизи бактериями имеет даже более важное значение, чем их глюкуронидазная активность. В связи с этим нельзя исключить, что присутствие хеликобактерной инфекции в желчном пузыре влияет именно на это звено билиарного литогенеза. В эксперименте К. Maurer и соавт. показано, что у инфицированных мышей в слизистой оболочке желчного пузыря развивается воспаление, которое также сопровождается повышенной продукцией муцина. Косвенным подтверждением этой гипотезы является быстрое формирование желчных камней (в течение 8 нед.). Нельзя исключить и тот факт, что бактерии могут вырабатывать растворимый антиген или антигены, которые способны модулировать ключевые гены, ответственные как за продукцию слизи, так и формирование литогенной желчи.

Учитывая экологическую нишу энтерогепатических хеликобактеров, вполне логично предположить, что они могут модулировать и энтерогепатическую циркуляцию желчных кислот, влияя прямо или косвенно (через генную регуляцию энтероцита) на процессы абсорбции в кишке.

К другим возможным факторам, влияющим на билиарный литогенез, можно отнести и различные медиаторы воспаления, секретируемые в ответ на антигенную стимуляцию, которые способны изменять фазовое равновесие желчи и тем самым ускорять образование кристаллов холестерина.

Слабым местом в изложенной концепции является тот факт, что микробы удается обнаружить не у всех больных с холелитиазом, а также то, что их находят и в части случаев без желчных камней. Эти веские аргументы позволяют говорить, что хеликобактериая инфекция — не обязательный фактор билиарного литогенеза, а скорее всего кофактор. Вместе с тем по мере накопления научных фактов можно предполагать появление новой гипотетической модели холелитиаза из 3 основных факторов (окружающая среда, наследственность и инфицирование энтерогепатическими хеликобактерами), каждый из которых участвует в образовании холестериновых желчных камней, способствует воспалению, метаплазии, дисплазии и, возможно, потенцирует развитие рака желчного пузыря.

Антинуклеирующие факторы


Ho сравнению с пронуклеирующими факторами данных об антинуклеирующих факторах имеется значительно меньше. Идентифицировано несколько ингибиторов кристаллизации холестерина: аполипопротеиды A-I и А-IT, гликопротеид массой 120 кДа, секреторный IgA, желчные кислоты, аспирин и др.

Нa модели перенасыщенной желчи было показано, что присутствие аполипоиротеидов A-I и A-II в желчи человека ингибирует кристаллизацию холестерина и продлевает время нуклеации.

Исследование показали, что антинуклеирующим потенциалом нормальной желчи человека обладает и обнаруженный в желчном пузыре кислый гликопротеид массой 120 кДа. Белок ингибирует рост кристаллов, осаждаясь на наиболее быстро растущих краях и на поверхности кристалла, препятствуя сто дальнейшему росту. С помощью видеомикроскопии с увеличением установлено, что края кристаллов моногидрата холестерина представляют зоны наиболее быстрого роста.

Секреторный иммуноглобулин A (slgA) является основным компонентом различных секретов, включая и желчь. Физиологическое значение slgA состоит в том, что он препятствует адгезии микробов на слизистые оболочки. Секретируется печенью и желчным пузырем как комплекс, состоящий из мономеров IgA и секреторного компонента, который необходим для проникновения IgA через эпителиальные клетки. Как отмечено выше, IgA вызывает наименее выраженный пронуклеирующий эффект по сравнению с другими иммуноглобулинами.

Исследования показали, что секреторный IgA ингибирует кристаллизацию холестерина на модели перенасыщенной желчи в зависимости от дозы; максимальная скорость ростам финальная концентрация кристаллов были значительно снижены даже с физиологической концентрацией.

Лечение УДXK в течение 3 мес. перед холецистэктомией увеличивало время нуклеации у больных с холестериновыми желчными конкрементами. Это дало основание включить УДХК в группу веществ, вызывающих антинуклеирующий эффект.

В экспериментах на модели желчи показано, что аспирин и другие нестероидные противовоспалительные средства ингибируют секрецию муцина слизистой оболочкой желчного пузыря и предотвращают формирование желчных камней. Результаты экспериментальных исследований были подтверждены в дальнейшем и на человеке. Ho данным R.K. Sterling и соавт., у больных с желчными конкрементами концентрация муцина в желчном пузыре была значительно выше по сравнению с пациентами без камней (0,897 ± 0,226 против 0,173 ± 0,039 мг/мл) (р < 0.02 ). В го же время среди пациентов, систематически принимавших HНBC, концентрация муцина в желчи была снижена по сравнению с пациентами, не пользовавшимися этими препаратами (0,74 ± 0,19 мг/мл против 1,18 ± 0,43).

Несмотря на то что как экспериментальные, так и клинические исследования демонстрируют антинуклеарный эффект целого ряда веществ, in vivo трудно установить суммарный ингибирующий эффект этих антинуклеаторов. Неизвестно, действуют ли они поодиночке или в комплексе, ингибируя формирование кристаллов холестерина. Остается неизвестным триггерный механизм, приводящий к нарушению дисбаланса между про- и антинуклеирующими факторами. Высказывается предположение, что униламеллярные везикулы являются главным местом, где развиваются эти события.

Следует отметить, что имеющиеся доказательства, подтверждающие значение различных про- и антинуклеирующих белков в формировании желчных камней, еще недостаточно убедительны или не всегда физиологичны. Новые технологии позволят внести дополнительный вклад в изучение процессов нуклеации холестерина и роста кристаллов в желчи, оценить роль промоторов и ингибиторов кристаллизации холестерина, сделать процессы формирования желчных камней более понятными.

Расширение знаний относительно роли про- и антинуклеирующих факторов и их взаимодействия в желчном пузыре позволит разработать новый подход к лечению и профилактике ЖКБ.

Однако уже в настоящее время получены неоспоримые доказательства влияния функций желчного пузыря и процессов всасывания в тонкой кишке на формирование желчных камней при наличии литогенной желчи.